我在 2017 年或者更早，就搭建了自己的独立博客，那时主要写一些随笔，更的很少很慢。研究生和工作之后，开始转向写一些技术内容，当然了，主要是一些学习笔记，毕竟我还没有到能独立输出知识的地步。同时博客的更新频率也相对多了些。一方面，我关注的方向比较多，涉猎广泛杂乱；另一方面，我逐渐养成整理知识体系的习惯，并使用了一些 Markdown 类的管理工具，方便转成博客。

属于独立博客的时代已经过去了。我所坚持的似乎是一件很老套的事情，就如同在精心维护一片野花园，却处在偏远山中，少有人游览。但我觉得呢，那些花儿本身，就值得被栽种盛开。

我想，写博客的目的，首先是记录。“那些很渺小的东西，都是我人生的大事。”我始终保持对文字的敬畏，我们应该记录和表达一些东西。只可惜，我好像能静下来思考的时间越来越少，我好久没能写一篇完整的随笔。

其次，写博客的目的是共享。我很乐意分享我学习和总结到的一些东西，并期待在提供帮助的同时，也能收到一些反馈。从后台统计看，我很高兴一些内容似乎帮助到了某些陌生人，至少，对 AI 起了帮助。

此外，我认为比无知更可怕的是误解。我担心在传递这些内容的同时，由于我的不足也传递了谬误。所以，亲爱的陌生人，如果您有任何的疑问，请一定不要吝惜与我交流（ jiangshen@outlook.com ）。

基本概念

色谱流出曲线

色谱流出曲线（elution profile）：经色谱柱分离后的各组分随流动相依次进入检测器，检测器将流动相中各组分浓度或质量的变化转变为可测量的电信号，记录此信号强度随时间变化的曲线，称为色谱流出曲线，又称为色谱图（chromatogram）。

Figure 1. 色谱流出曲线

我们知道理想色谱峰是对称。但如果具体去了解相关内容，通常会告诉我们理想的色谱峰不仅是对称的，更是近似于正态分布曲线。以人民卫生出版社《分析化学》第 8 版为例：

正常色谱峰为对称形正态分布曲线，曲线有最高点，以此点的横坐标为中心，曲线对称地向两侧快速、单调下降。

那么，该如何理解“理想的色谱峰近似于正态分布曲线”呢？

大量随机过程的叠加

首先我们假设没有色谱柱的存在。当我们足够快地向流路中注入化合物，化合物被迅速洗脱，并被检测器检测到。因为我们注入速度和洗脱速度足够快，色谱峰是一条 \(t=0\) 竖线。

酶动力学基本参数

米氏方程

1902 年 Victor Henri 提出了酶- 底物中间复合物学说，认为首先是酶 E 与底物 S 生成酶-底物 中间复合物 ES，然后 ES 分解生成产物 P 和游离的酶。

\[ \ce{E + S <=>[k_1][k_2] ES ->[k_3] E + P} \]

式中的 \(k_{1}\)、\(k_{2}\) 和 \(k_{3}\) 分别为各向反应的速率常数。

色谱柱基本结构

Figure 1. 液相色谱柱

常见的 HPLC 色谱柱由不锈钢柱体和两端的筛板（frit），以及柱内填料组成。两端的筛板主要防止填充颗粒流失和色谱柱堵塞；对于分配色谱，填料通常以硅胶颗粒作为载体，在硅胶表面键合有固定相。

假设检验方法选择思维导图

2025.05.11

基于目前个人对统计学的理解，做了一个假设检验方法选择的思维导图。目前仅是从采集的数据类型切入的，对于假设检验方法的选择应该还是比较直观易懂。

如果是从自变量和因变量角度来看，如单因素方差分析，可以看作分类数据自变量对定量数据因变量的影响，因此也就能将“回归相关”纳入到一个更大体系里。后面可能也出一版这样的思维导图。

基础知识

统计学的研究内容

统计学是关于数据资料的收集、整理、分析和推断的一门科学。它可分为描述统计学和推断统计学两大类。

描述统计学是研究数据收集、处理、描述及可视化的统计学方法，其内容包括如何取得研究所需要的数据，如何用图表形式对数据进行处理和展示，如何通过对数据的综合、概括与分析，得出所关心的数据特征。如果在研究中可以得到整个总体的数据，那么描述统计学就足够了。

但是，实际中往往只能得到总体的一小部分（称为样本），这就需要通过这些样本的有限的样本信息来推断有关总体特征，这就是推断统计学的研究领域，又分为参数估计和假设检验。

血球计数板

血球计数板用优质厚玻璃制成，通过 H 形凹槽分为两个相同的计数池。每个计数池的两侧都有一个支持柱，上面覆盖着特制的盖玻片，形成高度为 0.10 mm 的计数池。

计数池内划分为长和宽各为 3 mm 的方格，总共分为 9 个大方格。每个大格面积为 1.0 mm，体积为 0.1 mm³，即一个大方格的体积是 0.1 μL。

转膜

材料

• 转印缓冲液（含有 20% 甲醇的 1X Tris-甘氨酸缓冲液）

甲醇能减少凝胶的膨胀并提高蛋白质与硝酸纤维素膜的结合效率。转膜效率受以下因素影响：电泳缓冲液中是否存在 SDS、转膜缓冲液的 pH 及转膜前凝胶中的蛋白质是否已染色。为最大限度地提高转膜效率，SDS 的浓度不应超过 0.1%，转膜缓冲液 pH 必须 ≥8.0。

SDS-PAGE 凝胶制备

材料

• 30% 丙烯酰胺/N,N'-亚甲基双丙烯酰胺混合液（29∶1, m/m）
• 10% 过硫酸铵（APS, m/V）
• 10% SDS 溶液
• 四甲基乙二胺（TEMED）
• 1.5 M Tris-HCl（pH8.8）
• 1.0 M Tris-HCl（pH6.8）
• 去离子水
• 异丙醇（或 70% 乙醇或水饱和丁醇）

设备

• 垂直电泳槽