小鼠尾静脉注射技巧
前言
尾静脉注射是小鼠实验最常见的给药方式之一，也是较难掌握的小鼠实验技能。我在很长一段时间内，也是一直没有掌握到实验精髓。
在早期实验条件差的时候，我们都是先把小鼠麻醉，然后用 250 mL 或是 500 mL 的烧杯扣住，把小鼠的尾巴从杯嘴漏出来，接着用 1 mL 注射器给药。在如此条件下，我们实验室历史上仍然有两三个人能取得较高的成功率，每一位一到实验都是炙手资源，可谓是实验的大救星。我本人也曾尝试努力钻研相关技巧，一度能达到尾静脉注射 C57 有近 50% 的成功率，甚至颇为自豪，可惜的是一个月后的才开始正式实验，生疏许久之后手感全无，无奈最后还是请来帮手。至此，只能放弃认命，而我提升实验室地位的尝试也就此失败。
后来到了一个新实验室，老板斥资买了一个小鼠尾静脉注射仪，摸索了一下，发现相当实用，熟练后一针成功率估计有 80%，两针基本都能打进，不经感叹“科技改变生活”。很早以前在网上听过某个老师讲一句话，大意是“科研 = IT = Ideas + Tools”，如今想来，感慨万千，不经潸然泪下。
小鼠尾巴结构
如下图所示，小鼠尾巴有三条静脉和一条动脉，即成对的外侧尾静脉、不成对的背部尾静脉和腹侧尾动脉。背部尾静脉（dorsal tail vein）并不是笔直的，因此通常从两个外侧尾静脉（lateral tail veins）给药。我的习惯是从小鼠尾尖到尾根的 1/3 到 1/2 处开始尝试注射，不成功再向上寻找位点注射（逐渐靠近近心端）。
Figure 1 小鼠尾巴结构图1
注射器的选择
1 mL 注射器通常为 26G，我习惯直接使用胰岛素注射针，一般为规格为 29G 或者更细 。针的长度不能选的太短，毕竟还要留空间进针；也不能太长，因为细的针越长就越软。31G × 8 mm 的胰岛素针刚好合适。
另外，胰岛素针可能存在两种型号：“U40”和“U100”，推荐选择“U100”，刻度更小，而且每个刻度代表的体积也更好计数。
表 1 注射器规格和对应针头外径2
| 规格 (G) | 公称外径 (mm) | 规格 (G) | 公称外径 (mm) |
|---|---|---|---|
| 34G | 0.18 mm | 21G | 0.8 mm |
| 33G | 0.2 mm | 20G | 0.9 mm |
| 32G | 0.23 mm | 19G | 1.1 mm |
| 31G | 0.25 mm | 18G | 1.2 mm |
| 30G | 0.3 mm | 17G | 1.4 mm |
| 29G | 0.33 mm | 16G | 1.6 mm |
| 28G | 0.36 mm | 15G | 1.8 mm |
| 27G | 0.4 mm | 14G | 2.1 mm |
| 26G | 0.45 mm | 13G | 2.4 mm |
| 25G | 0.5 mm | 12G | 2.7 mm |
| 24G | 0.55 mm | 11G | 3 mm |
| 23G | 0.6 mm | 10G | 3.4 mm |
| 22G | 0.7 mm |
操作流程
我所使用的尾静脉注射神器如下图，上海玉研科学仪器有限公司 生产，具体型号已经忘记了。类似设备其他厂家也有很多，主要依靠鼠筒来固定小鼠，投射光源使小鼠血管更加清晰。
Figure 2 小鼠尾静脉注射仪
具体流程：
准备好尾静脉注射神器，并连接好电源线；
胰岛素针（31G × 8 mm，U100）提前吸取药物，并排尽气泡；
将小鼠固定在李氏鼠筒中，确保小鼠前后无法移动，避免在进针时，小鼠抽动使针头刺出血管；
小鼠侧卧位放置，即将任意一外侧尾静脉朝上，尾巴通过透射光源，找到血管位置；
可以使用 40–45 °C 温水浸泡或 70% 酒精擦拭小鼠尾巴，使血管更加清晰；
左手拽紧小鼠尾巴，使小鼠尾巴绷直，同时保证小鼠尾巴与桌面平行；
右手持针，针尖切面朝上，水平 10° 角，在下图中弧度开始处（下图中食指抵住鼠尾形成的拐角开始处）进针；
Figure 3 小鼠尾静脉注射3
- 大约进 1/3 – 1/2 个针尖后，稍稍上挑（水平 0° 到 -5° 角），延着血管缓慢进针 2–4 mm；
注：图中的给药手法，缺点是右手持针较远，进针方向难以准确控制，需要多加练习。
轻轻推动注射器，无阻力（与在体外空推液体的阻力感基本一致），即可继续推注；
刚开始练习无法判断是否准确进针时，可以在推注前回抽看是否回血；
给药完成后，注射器旋转半圈再拔出针头，以干棉球按压止血。
注：此视频（ 小鼠尾静脉注射操作及细节_哔哩哔哩_bilibili）在我练习过程中提供了很大帮助，推荐前往观看。
References
[1] Shimizu S. CHAPTER 32 - Routes of Administration[M]//Hedrich H J, Bullock G. The Laboratory Mouse. London: Academic Press, 2004: 527-542.
[2] 一次性使用注射针 识别色标: YY/T 0296-2022[S].
[3] https://research.unc.edu/wp-content/uploads/2021/06/mouse-class-handout.pdf